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Introducción a la fotografía microscópica

A Michael Peres le encanta fotografiar los pequeños detalles de nuestro mundo natural. Peres, profesor de comunicaciones fotográficas biomédicas en el Instituto de Tecnología de Rochester, se especializa en capturar estos detalles intrincados fotografiando con un microscopio. Aquí explica cómo lo hace.

Me interesé en tomar fotografías de cosas diminutas hace más de 40 años mientras estudiaba pre-medicina en la universidad. Estuve expuesto a este mundo fascinante e invisible mientras aprendía cómo delinear el tejido muscular del tejido conectivo usando un microscopio óptico. Me atraía cada materia nueva que me pedían que estudiara y todavía me sorprende cómo se organizan las cosas. Me encanta fotografiar copos de nieve, flores y otros objetos naturales. Empecé a compartir mi trabajo en Instagram en marzo de 2014 y me han fascinado los seguidores de todo el mundo que se sienten atraídos por mis imágenes.

Encontrar un sujeto para fotografía microscópica

Encontrar un buen tema comienza con mantener la curiosidad por el mundo. Creo que es realmente importante tener la mente abierta sobre las muestras potenciales. El otro día, de paseo con mi perro, llegó a casa cargado de rebabas. Después de sacar tantos como pude, decidí examinar uno bajo el microscopio. Era solo una mala hierba, pero bajo el microscopio se volvió elegante y complejo.

Ubicar y manipular objetos pequeños es una gran parte del éxito del proceso. Las muestras dañadas o aquellas con artefactos tendrán una presentación visual diferente a las muestras excelentes y es importante no dejar que el daño se convierta en el foco de la fotografía. Encontrar una muestra sin imperfecciones es la primera prioridad para el tipo de fotografías que quiero hacer. Eso no quiere decir que los sujetos de mi fotografía sean perfectos, no lo son.

Hay dos cosas diferentes en las que estoy pensando cuando preparo una muestra fotografiar:disección y aislamiento, cuál de estos tiene prioridad depende del sujeto y su aumento. Cuando fotografío flores, normalmente uso tijeras de disección para quitar los pétalos y mejorar la visibilidad de sus elementos estructurales. Cuando fotografío organismos acuáticos, intento aislarlos en una gota de agua bajo un cubreobjetos. Menos es siempre más en este caso. Cada sujeto presenta problemas únicos y requiere diferentes métodos para hacer que la muestra sea lo suficientemente pequeña, plana o delgada para fotografiar.

También compro portaobjetos biológicos preparados, como cortes transversales de plantas o tejido animal; es muy difícil preparar este tipo de portaobjetos sin equipo de precisión. Wards Natural Science y Carolina Biological Supply Company venden miles de sujetos preparados para el examen microscópico.

Equipo necesario para hacer una imagen microscópica

Cuando tomo imágenes microscópicas, mi equipo crucial son los microscopios, una luz de fibra óptica, un cuerpo de cámara DSLR, una lente macro, tubos de extensión, fuelles y un trípode. Cuando estoy fotografiando copos de nieve, flores u otros sujetos que se encuentran en la naturaleza, a menudo estoy en mi garaje y mantengo un suministro listo de portaobjetos de microscopio limpios y un trozo de tela de terciopelo negro para usar como fondo. También tengo muchas agujas, cepillos diminutos y palitos con punta de algodón que utilizo para mover las muestras y limpiar el área que las rodea.

Usualmente uso un microscopio óptico compuesto para mis fotografías. Los microscopios ópticos son bastante comunes y fáciles de encontrar. Pueden ser costosos o relativamente baratos, un microscopio para estudiantes puede costar tan solo $ 250, mientras que un microscopio de grado de investigación de alto nivel puede costar $ 200,000. Se puede encontrar un microscopio usado de grado de investigación de gama baja bastante bueno por $5000.

Los microscopios amplían sujetos usando dos lentes. La primera etapa de aumento es producida por la lente del objetivo y la segunda etapa de aumento es el ocular. Una lente objetivo tiene una distancia focal igual que las lentes fotográficas tradicionales que se usan en una cámara DSLR. Las distancias de trabajo son muy pequeñas para este tipo de fotografía:un rango típico de aumentos del objetivo para un microscopio óptico puede incluir 2x, 4x, 10x, 20x, 40, 60x o 100x. Elijo mi lente en el microscopio según los requisitos de aumento de la muestra. El aumento influye en la profundidad de campo de la imagen, por lo que una muestra grande y gruesa (0,5 cm) se beneficia de un aumento bajo, mientras que los sujetos muy planos necesitan más aumento.

Cuando se usa un microscopio óptico, es posible tomar fotografías con un teléfono inteligente o una cámara de lente fija y es un excelente punto de partida. Con estas cámaras, la lente debe colocarse en el punto del ojo del microscopio, que se puede ubicar sujetando una hoja de papel a aproximadamente 1 cm del ocular del microscopio. Un punto muy pequeño de luz será visible en el papel, este es el punto del ojo y hacia donde se debe dirigir la lente. Un trípode pequeño puede ser útil para sostener la cámara en su lugar. La cinta Gaffer suele ser mi mejor amiga como fotógrafo técnico porque me permite proteger el teléfono de otros elementos del sistema durante mis tomas.

Aunque funciona usar un teléfono inteligente o una cámara con lente fija, me gusta usar una Nikon D300s o D800 con la lente extraída y el cuerpo colgado sobre el ocular del microscopio usando un soporte de copia vertical o un trípode. También uso tubos de extensión o fuelles en mi cámara para controlar la luz ambiental, lo que puede crear destellos y reducir el contraste. Con una DSLR, debe alinear el sensor de la cámara sobre el pequeño punto de luz desde el punto de mira. Para hacer una imagen microscópica, alinearé el sensor de mi cámara sobre el ocular a una distancia donde el círculo de iluminación producido por el microscopio sea lo suficientemente grande como para cubrir el sensor sin ver el círculo. Confirme que el punto de luz haya cubierto el sensor comprobando la pantalla LCD de la cámara. Sin embargo, tenga cuidado al configurar:es muy importante tener en cuenta la distancia entre el ocular y el sensor desprotegido.

Iluminando tu sujeto microscópico

Utilizo principalmente la luz integrada del microscopio y la complemento con iluminación de fibra óptica. Cuando miro una muestra por primera vez, visualizo cómo quiero que se vea la imagen y trabajo para llegar allí. Hago muchos pequeños ajustes en la posición de la luz, lo que hace una gran diferencia en los resultados. Algunos de los sujetos que estoy fotografiando pueden tener un tamaño de uno o dos milímetros, o más pequeños. Cuánta luz de relleno se necesita o qué hace que el ángulo de la luz sea el correcto son las decisiones que tomo antes de disparar. Mi estrategia se basa en gran medida en cómo funciona la luz con la muestra en sí. Los tres estilos de iluminación que utilizo con más frecuencia son Kohler, Darkfield y Polarized. Siga leyendo para obtener más información sobre cada uno de ellos.

Cómo uso la iluminación Kohler cuando fotografío sujetos microscópicos

Cuando fotografío una “sección delgada” preparada, intento crear una retroiluminación neutra y uniforme denominada iluminación Kohler. Este estilo de iluminación permite al microscopista maximizar el contraste y la resolución de la imagen y la producción de una iluminación uniforme y uniforme detrás de la muestra. Sigo usándolo porque crea tratamientos similares a retratos de las cosas que fotografío.

Cómo uso la iluminación de campo oscuro mientras fotografío objetos microscópicos

También usaré el campo oscuro, que hace que un objeto brille contra un fondo negro , creando un aspecto de tipo astronómico. La iluminación de campo oscuro proviene de detrás de un sujeto transparente y se proyecta a través de la muestra en ángulos oblicuos. Este estilo de iluminación produce una apariencia muy dramática, la desventaja es que todo se iluminará al usar el campo oscuro, incluidas las cosas que no desea que se iluminen, como la suciedad, los rayones o las burbujas de aire.

Cómo uso la iluminación polarizada mientras fotografío objetos microscópicos

Utilizo luz polarizada cuando fotografío muestras que muestran birrefringencia, que es un término técnico que describe cómo una muestra puede o no "mostrar" colores similares al arco iris cuando se coloca en un microscopio de luz polarizada. Las muestras que incluyen cabellos, fibras, productos químicos, minerales, algunas alas de insectos y muchos objetos sintéticos se verán como si estuvieran hechas de arco iris cuando se examinan con luz polarizada. La luz polarizada se usa para revelar información interna en estas muestras que, de otro modo, podría no ser visible.

Enfocar mientras se toman fotografías microscópicas

Para enfocar la imagen ampliada con mi DSLR, quito la lente de la cámara y proyecto la imagen directamente en el cuerpo de la cámara DSLR. Los controles de enfoque del microscopio se utilizan luego para enfocar la imagen en el visor de la cámara. Hacer una imagen nítida puede ser un desafío. El visor de la DSLR no capta la misma cantidad de detalles finos que el microscopio puede crear, por lo que las cosas a menudo se ven un poco más ásperas en el visor que en los archivos RAW. Se necesita algo de práctica para poder predecir cómo aparecerá la imagen una vez que se grabe.

También es posible enfocar usando la vista en vivo. En una habitación con poca luz, esto puede ser muy útil para observar la definición de imagen crítica dentro de una muestra. Si está utilizando un teléfono inteligente que se ha colocado cuidadosamente sobre el ocular, aún querrá enfocar la imagen que se muestra en la pantalla del teléfono manipulando la perilla de enfoque del microscopio.

Procesando sus imágenes microscópicas

Uno de los mayores desafíos en este tipo de trabajo es crear el contraste y la delineación estructural de las partes internas y trato de hacer el trabajo duro durante las tomas. Cuando estoy fotografiando, trabajo lentamente para lograr un resultado interesante usando lentes y luz.

Soy muy cauteloso con el procesamiento excesivo de imágenes. En el posprocesamiento, lo que más me interesa es la gestión del tono, establecer puntos blancos o negros y eliminar la suciedad irrelevante. Disparo en RAW, abro el archivo RAW en Photoshop y luego preproceso los detalles estructurales que están presentes en el archivo, pero que a menudo no son muy visibles. También realizo una pequeña cantidad de clarificación o nitidez en esta etapa. Después de realizar pequeños cambios de tono en Photoshop, enfocaré el archivo usando el filtro de paso de banda alta.

Creo que es importante que las imágenes no sean totalmente perfectas. Nada es perfecto en la vida y creo que si las imágenes son demasiado perfectas, pueden parecer generadas por computadora. Mi objetivo para este trabajo es hacer fotografías científicas que operen en entornos no científicos y permitan a las personas aprender algo nuevo sobre el mundo en el que viven. Mis imágenes presentan cosas reales y la vida también tiene imperfecciones y áreas que están fuera de foco.


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